改良科瑪嘉O157顯色培養(yǎng)基使用說(shuō)明書(shū)

組分

科瑪嘉O157顯色培養(yǎng)基一瓶，添加劑A和B各一支。

瓊脂 15.0 g/L   蛋白胨和酵母粉 13.0 g/L   色素1.2 g/L

pH值 6.9±0.2℃

操 作
1、取瓶?jī)?nèi)干粉29.2g溶于1000mL去離子水的潔凈三角瓶中，充分?jǐn)嚢杌靹?。也可根?jù)需要按照29.2 g/L的比例擴(kuò)大或縮小制備培養(yǎng)基的量。

2、加熱至100℃，不停攪拌，使其*溶解。切勿加熱超過(guò)100℃，切勿121℃高壓滅菌。若使用微波爐加熱，應(yīng)將培養(yǎng)基加熱沸騰，立即移出，輕輕搖勻，再放入微波爐加熱，觀察小氣泡變?yōu)榇髿馀?，直?溶解即可。切勿使培養(yǎng)基溢出。
3、加熱后的培養(yǎng)基冷卻至45℃~50℃，輕輕地?fù)u動(dòng)均勻，傾注平皿，使其凝固，晾干備用。

對(duì)于污染較為嚴(yán)重的樣品，使用添加劑可增強(qiáng)CHROMagar O157顯色培養(yǎng)基的選擇性：

       在添加劑A中加入1ml無(wú)菌水，在添加劑B中加入1ml 95%乙醇，輕輕搖動(dòng)或放置于37℃水浴中，待內(nèi)容物全部溶解方可使用。然后以無(wú)菌操作分別加入到冷卻至45℃~50℃的培養(yǎng)基中，輕輕混勻。（添加劑A、B各1ml，用于1000ml培養(yǎng)基，可按比例放大或縮小，剩余的添加劑可以保存在-20℃冰箱中，有效期為半年）。

保存  該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內(nèi)貯存2周（2℃~8℃，避光）。

接種

劃線或涂布接種（冰箱內(nèi)保存的平板使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫），在36

±1℃恒溫條件下有氧培養(yǎng)18-24h。

結(jié)果

性能及局限

   大腸桿菌O157靈敏度為98%（Bettelheim et al. 1998）。但缺乏亞碲酸鉀時(shí)，各種非大腸桿菌O157菌株可以出現(xiàn)相同顏色的菌落（如沙門(mén)氏菌）。建議通過(guò)乳膠試驗(yàn)驗(yàn)證可疑菌落。大腸桿菌O157的鑒定需要做血清學(xué)實(shí)驗(yàn)。

貯存條件

干粉需保存于15℃~30℃干燥環(huán)境中，在有效期前使用。

污染處理

使用過(guò)的培養(yǎng)基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關(guān)規(guī)定丟棄。

附：供體外診斷使用，產(chǎn)品須專(zhuān)業(yè)人員操作。